動物細胞培養(yǎng)：

1、動物細胞的培養(yǎng)：動物細胞培養(yǎng)就是從動物機體中取出相關的組織，將它分散成單個細胞，然后放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細胞生長和繁殖。
2、動物細胞培養(yǎng)液的成分：葡萄糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等。
3、動物細胞培養(yǎng)液的特點：液體培養(yǎng)基含動物血清。
4、動物細胞培養(yǎng)需要滿足以下條件
(1)充足的營養(yǎng)供給??微量元素、無機鹽、糖類、氨基酸、促生長因子、血清等。
(2)適宜的溫度：36.5℃±0.5℃；適宜的pH：7.2～7.4。
(3)無菌、無毒的環(huán)境：培養(yǎng)液應進行無菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素，以防培養(yǎng)過程中的污染。此外，應定期更換培養(yǎng)液，防止代謝產(chǎn)物積累對細胞自身造成危害。
(4)氣體環(huán)境：95%空氣+5%CO₂。O₂是細胞代謝所必需的，CO₂的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。
5、動物細胞培養(yǎng)的過程：
取動物組織塊（動物胚胎或幼齡動物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞→制成細胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進行原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)。





植物組織培養(yǎng)和動物細胞培養(yǎng)：

項目		植物組織培養(yǎng)	動物細胞培養(yǎng)
理論基礎		植物細胞的全能性	細胞增殖
培養(yǎng)基	類型	（半）固體培養(yǎng)基	液體培養(yǎng)基
	成分	水、礦質(zhì)元素、維生素、蔗糖、氨基酸、瓊脂	葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素、促生長因子、動物血清等
取材		植物幼嫩部位或花藥等	動物胚胎或出生不久的幼齡動物的器官或組織
過程
結果		新的組織或植株個體，可以體現(xiàn)全能性	新的細胞系或細胞株，不形成個體，不體現(xiàn)全能性
應用		①植株快速繁殖 ②脫毒植株的培育 ③人工種子 ④生產(chǎn)藥物、殺蟲劑等 ⑤轉(zhuǎn)基因植物的培育	①蛋白質(zhì)坐物制品的生產(chǎn) ②皮膚移植材料的培育 ③檢測有毒物質(zhì) ④生理、病理、藥理學研究
相同點		①兩技術手段培養(yǎng)過程中都進行有絲分裂，都是無性繁殖，都可稱克隆，都不涉及減數(shù)分裂 ②均需無菌操作，需要適宜的溫度、pH等條件

知識點撥：

1、細胞貼壁和接觸抑制：懸液中分散的細胞很快就貼附在瓶壁上，稱為細胞貼壁。細胞數(shù)目不斷增多，當貼壁細胞分裂生長到表面相互抑制時，細胞就會停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細胞的接觸抑制。
2、動物細胞培養(yǎng)技術的應用：制備病毒疫苗、制備單克隆抗體、檢測有毒物質(zhì)、培養(yǎng)醫(yī)學研究的各種細胞。
3、細胞株傳至50代后，不能再傳下去，但有部分存活的細胞一般能夠傳到40～50代，這種傳代細胞叫做細胞株。
4、細胞株細胞的遺傳物質(zhì)沒有發(fā)生改變。當細胞株傳至50代以后又會出現(xiàn)“危機”，不能再傳下去。但是有部分細胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變，而且?guī)в邪┳兊奶攸c，有可能在培養(yǎng)條件下無限制地傳代下去，這種傳代細胞成為細胞系。

知識拓展：

1、動物細胞培養(yǎng)技術的應用
(1)生產(chǎn)病毒疫苗、單克隆抗體、干擾素等。
(2)利用動物細胞培養(yǎng)技術中的細胞貼壁生長和接觸抑制的特點，可用燒傷病人自己的健康皮膚細胞培養(yǎng)出大量的自身薄層皮膚細胞，以供植皮所需。
(3)培養(yǎng)的動物細胞用于檢測有毒物質(zhì)，判斷某種物質(zhì)的毒性。
2、用胰蛋白酶處理組織塊，可使細胞分散開，這樣做的目的是使細胞與組織液充分接觸，這也說明了細胞間的主要物質(zhì)是蛋白質(zhì)。
3、當動物細胞培養(yǎng)超過50代后，少數(shù)細胞發(fā)生突變而持續(xù)分裂成為癌變細胞。癌細胞失去了接觸抑制，可以在培養(yǎng)瓶中形成多層細胞。
4、動物細胞培養(yǎng)基成分特有的動物血清含有蛋白質(zhì)、氨基酸、葡萄糖、激素等多種成分．
5、植物組織培養(yǎng)最終產(chǎn)生新個體，體現(xiàn)全能性；動物細胞培養(yǎng)產(chǎn)生大量細胞，不形成新個體，故不能體現(xiàn)全能性。

相關高中生物知識點：科學研究方法

科學研究方法：

1、假說??演繹法
①提出假設
②演繹就是推理
③實驗驗證假設和推理
④得出結論
2、同位素示蹤法：同位素示蹤法是利用放射性核素或稀有穩(wěn)定核素作為示蹤劑對研究對象進行標記的微量分析方法
3、科學的研究方法包括：歸納法、類比推理法、實驗法和演繹法。
①歸納法：是從個別性知識，引出一般性知識的推理，是由已知真的前提，引出可能真的結論。它把特性或關系歸結到基于對特殊的代表（token）的有限觀察的類型；或公式表達基于對反復再現(xiàn)的現(xiàn)象的模式（pattern）的有限觀察的規(guī)律。
②類比推理法：類比推理這是科學研究中常用的方法之一。類比推理是根據(jù)兩個或兩類對象有部分屬性相同，從而推出它們的其他屬性也相同的推理。簡稱類推、類比。它是以關于兩個事物某些屬性相同的判斷為前提，推出兩個事物的其他屬性相同的結論的推理。
③實驗法：通過試驗的論證得出所需數(shù)據(jù)，進行分析后得出結論。分為：化學物質(zhì)的檢測方法；實驗結果的顯示方法；實驗條件的控制方法；實驗中控制溫度的方法
④演繹法：從普遍性結論或一般性事理推導出個別性結論的論證方法。演繹法得出的結論正確與否，有待于實踐檢驗。它只能從邏輯上保證其結論的有效性，而不能從內(nèi)容上確保其結論的真理性。也可以從邏輯思維，逆向思維和想象思維延伸到其結論該以反證明。
4、實驗必須遵守的原則：
①設置對照原則：空白對照；條件對照；相互對照；自身對照。
②單一變量原則；
③平行重復原則
5、實驗的特性：對照，統(tǒng)一性質(zhì)。提出問題；設計方案；討論結果；分析問題。分為科學實驗；驗證性實驗；對照實驗等。

知識拓展：

1、生物學的歷史研究進展和相關實驗的敘述。
（1）孟德爾的假說??演繹法敘述
①提出假設（如孟德爾根據(jù)親本雜交實驗，得到F₁，Aa這對基因是獨立的，在產(chǎn)生配子時相互分離。這里假設的是一對等位基因的情況）；
②演繹就是推理（如果這個假說是正確的，這樣F₁會產(chǎn)生兩種數(shù)量相等的配子，這樣測交后代應該會產(chǎn)生兩種數(shù)量相等的類型）；
③最后實驗驗證假設和推理（測交實驗驗證，結果確實產(chǎn)生了兩種數(shù)量相等的類型）；
④最后得出結論（就是分離定律）
（2）遺傳物質(zhì)驗證的三個實驗：肺炎雙球菌的轉(zhuǎn)化實驗；噬菌體侵染細菌的實驗；煙草花葉病毒的重組實驗
（3）酶發(fā)現(xiàn)過程中的實驗：
①1777年，蘇格蘭醫(yī)生史蒂文斯從胃里分離一種液體（胃液），并證明了食物的分解過程可以在體外進行。
②1834年，德國博物學家施旺把氯化汞加到胃液里，沉淀出一種白色粉末。除去粉末中的汞化合物，把剩下的粉末溶解，得到了一種濃度非常高的消化液，他把這粉末叫作“胃蛋白酶”（希臘語中的消化之意）。同時，兩位法國化學家帕揚和佩索菲發(fā)現(xiàn)，麥芽提取物中有一種物質(zhì)，能使淀粉變成糖，變化的速度超過了酸的作用，他們稱這種物質(zhì)為“淀粉酶制劑”（希臘語的“分離”）。科學家們把酵母細胞一類的活動體酵素和像胃蛋白酶一類的非活體酵素作了明確的區(qū)分。
③1878年，德國生理學家?guī)於魈岢霭押笳呓凶鳌懊浮薄?BR>④1897年，德國化學家畢希納用砂粒研磨酵細胞，把所有的細胞全部研碎，并成功地提取出一種液體。他發(fā)現(xiàn)，這種液體依然能夠像酵母細胞一樣完成發(fā)酵任務。這個實驗證明了活體酵素與非活體酵素的功能是一樣的。因此，“酶”這個詞現(xiàn)在適用于所有的酵素，而且是使生化反應的催化劑。由于這項發(fā)現(xiàn)，畢希納獲得了1907年諾貝爾化學獎
（4）生長素的發(fā)現(xiàn)實驗：植物的向光生長和胚芽鞘實驗
2、同位素示蹤方法的應用，使人們可以從分子水平動態(tài)地觀察生物體內(nèi)或細胞內(nèi)生理、生化過程，認識生命活動的物質(zhì)基礎。例如，用C、O等同位素研究光合作用，可以詳細地闡明葉綠素如何利用二氧化碳和水，什么是從這些簡單分子形成糖類等大分子的中間物，以及影響每步生物合成反應的條件等。
3、放射性同位素示蹤技術，是分子生物學研究中的重要手段之一，對蛋白質(zhì)生物合成的研究，從DNA復制、RNA轉(zhuǎn)錄到蛋白質(zhì)翻譯均起了很大的作用。最近鄰序列分析法應用同位素示蹤技術結合酶切理論和統(tǒng)計學理論，研究證實了DNA分子中堿基排列規(guī)律，在體外作合成DNA的實驗：分四批進行，每批用一種不同的³²P標記脫氧核苷三磷酸，³²P標記在戊糖5'C的位置上，在完全條件下合成后，用特定的酶打開5'C－P鍵，使原堿基上通過戊糖5'C相連的³²P移到最鄰近的另一單核苷酸的3'C上。用最近鄰序列分析法首次提出了DNA復制與RNA轉(zhuǎn)錄的分子生物學基礎，從而建立了分子雜交技術，例如以噬體T₂-DNA為模板制成[³²P]RNA，取一定量T₂-DNA和其它一些DNA加入此[³²P]RNA中，經(jīng)加熱使DNA雙鏈打開，并溫育，用密度梯度離心或微孔膜分離出DNA-[³²P]RNA復合體測其放射性，實驗結果只有菌體T₂的DNA能與該[³²P]RNA形成放射性復合體。從而證明了RNA與DNA模板的堿基呈特殊配對的互補關系，用分子雜交技術還證實了從RNA到DNA的逆轉(zhuǎn)錄現(xiàn)象。
4、放射性同位素示蹤技術對分子生物學的貢獻還表現(xiàn)在：
a、對蛋白質(zhì)合成過程中三個連續(xù)階段，即肽鏈的起始、延伸和終止的研究；
b、核酸的分離和純化；
c、核酸末端核苷酸分析，序列測定；
d、核酸結構與功能的關系；
e、RNA中的遺傳信息如何通過核苷酸的排列順序向蛋質(zhì)中氨基酸傳遞的研究等等。
為了更好地應用放射性同位素示蹤技術，除了有賴于示蹤劑的高質(zhì)量和核探測器的高靈敏度外，關鍵還在于有科學根據(jù)的設想和創(chuàng)造性的實驗設計以及各種新技術的綜合應用。


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