細胞工程
植物體細胞雜交
動物細胞融合
理論基礎(chǔ)
細胞的全能性、細胞膜的流動性
細胞增殖、細胞膜的流動性
融合前處理
酶解法去除細胞壁(纖維素酶、果膠酶)
誘導手段
物理法:離心、振動、電激化學法:聚乙二醇(PEG)
誘導過程
正常小鼠免疫處理動物細胞的融合(物、化、生法)雜交瘤細胞的篩選與培養(yǎng)專一抗體檢驗陽性細胞培養(yǎng)單克隆抗體的提純
用途和意義
克服遠緣雜交的不親和障礙,大大擴展雜交的親本組合范圍應(yīng)用:白菜??甘藍等雜種植株
(1)制備單克隆抗體(2)診斷、治療、預(yù)防疾病,例如“生物導彈”治療癌癥
知識點撥:1、植物組織培養(yǎng)的注意事項:(1)接種時應(yīng)注意的事項:①接種室要消毒;②無菌操作;③接種時要防止交叉污染;④接種完立刻蓋好瓶口。(2)外植體接種前,需要將接種室、接種箱滅菌和對外植體消毒的操作:①接種前一天,將接種室的四個角落用甲醛溶液和高錳酸鉀熏蒸。②接種前1小時,在接種室內(nèi)用噴霧器噴灑來蘇水;桌椅也用來蘇水擦拭;接種箱內(nèi)用甲醛溶液和高錳酸鉀熏蒸。③將滅菌室和接種箱內(nèi)用紫外燈滅菌。④接種前,操作者用肥皂清洗雙手,擦干,再用酒精棉球擦拭雙手。⑤用次氯酸鈉溶液將外植體消毒。2、在離體的植物器官、組織或細胞脫分化形成愈傷組織的過程中,需要的條件:①消毒滅菌;②一定濃度的植物激素;③適宜的溫度;④充足的養(yǎng)料。3、影響植物組織培養(yǎng)的因素:①培養(yǎng)基配制;②外植體選;③激素的運用;④消毒;⑤溫度、pH、光照。4、植物組織培養(yǎng)中植物激素使用:物組織培養(yǎng)中關(guān)鍵性激素是生長素和細胞分裂素;同時使用生長素和細胞分裂素時,兩者用量的比例影響植物細胞的發(fā)育方向;先使用細胞分裂素,后使用生長素,細胞既分裂5、植物組織培養(yǎng)過程中分化成的幼苗需要移栽,移栽時,應(yīng)先將培養(yǎng)瓶的封口膜打開一段時間,讓試管苗在培養(yǎng)間生長幾日;移栽時需用流水清洗根部的培養(yǎng)基;最后幼苗需移植到消過毒的新環(huán)境下生活一段時間,等幼苗長壯后再移栽到土壤中。
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