細(xì)胞工程
植物體細(xì)胞雜交
動(dòng)物細(xì)胞融合
理論基礎(chǔ)
細(xì)胞的全能性、細(xì)胞膜的流動(dòng)性
細(xì)胞增殖、細(xì)胞膜的流動(dòng)性
融合前處理
酶解法去除細(xì)胞壁(纖維素酶、果膠酶)
誘導(dǎo)手段
物理法:離心、振動(dòng)、電激化學(xué)法:聚乙二醇(PEG)
誘導(dǎo)過(guò)程
正常小鼠免疫處理動(dòng)物細(xì)胞的融合(物、化、生法)雜交瘤細(xì)胞的篩選與培養(yǎng)專(zhuān)一抗體檢驗(yàn)陽(yáng)性細(xì)胞培養(yǎng)單克隆抗體的提純
用途和意義
克服遠(yuǎn)緣雜交的不親和障礙,大大擴(kuò)展雜交的親本組合范圍應(yīng)用:白菜??甘藍(lán)等雜種植株
(1)制備單克隆抗體(2)診斷、治療、預(yù)防疾病,例如“生物導(dǎo)彈”治療癌癥
知識(shí)點(diǎn)撥:1、植物組織培養(yǎng)的注意事項(xiàng):(1)接種時(shí)應(yīng)注意的事項(xiàng):①接種室要消毒;②無(wú)菌操作;③接種時(shí)要防止交叉污染;④接種完立刻蓋好瓶口。(2)外植體接種前,需要將接種室、接種箱滅菌和對(duì)外植體消毒的操作:①接種前一天,將接種室的四個(gè)角落用甲醛溶液和高錳酸鉀熏蒸。②接種前1小時(shí),在接種室內(nèi)用噴霧器噴灑來(lái)蘇水;桌椅也用來(lái)蘇水擦拭;接種箱內(nèi)用甲醛溶液和高錳酸鉀熏蒸。③將滅菌室和接種箱內(nèi)用紫外燈滅菌。④接種前,操作者用肥皂清洗雙手,擦干,再用酒精棉球擦拭雙手。⑤用次氯酸鈉溶液將外植體消毒。2、在離體的植物器官、組織或細(xì)胞脫分化形成愈傷組織的過(guò)程中,需要的條件:①消毒滅菌;②一定濃度的植物激素;③適宜的溫度;④充足的養(yǎng)料。3、影響植物組織培養(yǎng)的因素:①培養(yǎng)基配制;②外植體選;③激素的運(yùn)用;④消毒;⑤溫度、pH、光照。4、植物組織培養(yǎng)中植物激素使用:物組織培養(yǎng)中關(guān)鍵性激素是生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素;同時(shí)使用生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素時(shí),兩者用量的比例影響植物細(xì)胞的發(fā)育方向;先使用細(xì)胞分裂素,后使用生長(zhǎng)素,細(xì)胞既分裂5、植物組織培養(yǎng)過(guò)程中分化成的幼苗需要移栽,移栽時(shí),應(yīng)先將培養(yǎng)瓶的封口膜打開(kāi)一段時(shí)間,讓試管苗在培養(yǎng)間生長(zhǎng)幾日;移栽時(shí)需用流水清洗根部的培養(yǎng)基;最后幼苗需移植到消過(guò)毒的新環(huán)境下生活一段時(shí)間,等幼苗長(zhǎng)壯后再移栽到土壤中。
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